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西南医院临床新技术成果展之三十六:循环肿瘤细胞分型检测技术及其在非小细胞肺癌中的应用
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  信息分类-->>>医院动态 更新时间:2018-03-28
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      1896年澳大利亚医生Ashworth在转移性癌症患者血液中首次发现肿瘤细胞,将其定义为“循环肿瘤细胞”(CTCs)。循环肿瘤细胞是指自发或因诊疗操作由实体癌原发灶或者转移灶脱落并释放进入外周血液中的所有肿瘤细胞的统称。随着检测技术的突飞猛进,发现CTCs与肿瘤诊断、转移、预后等之间有强烈关联性,检测CTCs可以实时评估患者病情变化和治疗效果,但CTCs在血液中的数量极少,对检测技术的要求高,目前大多的检测方法都仅能检测带有上皮标记的CTCs,这会漏检经上皮-间质转化的部分CTCs。近两年CanPatrolTMCTCs分型检测技术的临床应用逐渐增多,国内数家医院已经开展相关技术应用,但存在入组人数较少使结果可靠性不足等缺点。

    我院检验科府伟灵教授团队应用CanPatrolTMCTCs分型检测新技术,通过滤膜法结合多重mRNA原位杂交技术、分支DNA信号放大技术,检测221例非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞数量及三种型别分布。具体方法是:多重mRNA原位杂交技术,通过对上皮细胞标志基因(EpCAMCK),间质细胞标志基因(VIMTWIST1AKT2SNAI1),白细胞标志基因(CD45)mRNA并行检测,不同基因的杂交探针与对应基因mRNA特异性结合,同一基因不同分型杂交探针与mRNA上不同位点特异性结合,根据mRNA表达情况将CTCs分为上皮型、上皮/间质混合型以及间质型;分支DNA信号扩大技术,不同标志基因mRNA与对应探针形成“mRNA—多条分型杂交探针—预扩增探针—多条扩增探针—多条显色探针—荧光染料”的分支状复合物,mRNA出现较蛋白早,再加上分支信号扩大,特异性和灵敏度均大幅提高。

CTCs分型检测作为“液体活检”,样本仅需5ml静脉全血,无创、可重复检测,比肿瘤组织样本易获取,不用频繁接受射线检查,是临床上理想的标本来源,可在患者治疗中提前预测远处转移,为临床医生及时更改治疗方案提供实验室依据,充分体现了“精准医疗,个体化治疗”,患者少受罪,减轻经济负担。

    循环肿瘤细胞分型检测技术在CTCs分离检测技术中处于国内外较好水平,在非小细胞肺癌患者的应用中探索出与远处转移相关的危险因子及远处转移预测方法,随着临床应用量的扩大,该技术将持续完善和更加准确。除了非小细胞肺癌,该技术还可应用于乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌、前列腺癌等各种实体肿瘤患者的外周血CTC检测。目前该技术已在第三军医大学学报、全国检验年会、重庆中西医结合检验年会、长沙检验年会会议上均作了专题报告,培养硕士研究生一名。

 
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